Блог

Jun 28, 2023

Оптимизация гомогенизации проб

Исследователям во многих областях необходимо извлекать интересующие молекулы из образцов для дальнейшего анализа. Критическим, ранним шагом в процедуре выделения является гомогенизация ткани или разрушение клеток.

Исследователям во многих областях необходимо извлекать интересующие молекулы из образцов для дальнейшего анализа. Важнейшим ранним этапом процедуры выделения является гомогенизация тканей или разрушение клеток — процесс, при котором клетки лизируются с целью высвобождения внутриклеточных аналитов, таких как нуклеиновые кислоты, белки или метаболиты. Эти молекулы можно анализировать с помощью различных методов, включая ПЦР, NGS и вестерн-блоттинг. Поскольку все эти методы анализа зависят от эффективной и воспроизводимой подготовки проб, оптимизация этого этапа является приоритетом.

Самый традиционный метод гомогенизации включает механическое измельчение образцов тканей с помощью ступки и пестика. Однако эта процедура требует много времени, трудоемка и может быть неоптимальной в зависимости от физико-химических свойств образца.1 Немеханические методы, включая химический лизис и обработку ультразвуком, также могут гомогенизировать образцы. Однако тепло, выделяемое при обработке ультразвуком, и детергенты, используемые при химическом лизисе, могут быть агрессивными для хрупких молекул, таких как РНК.1,2

Недавно разработанные механические методы сокращают трудозатраты и время, необходимые для лизиса, а также повышают эффективность гомогенизации. Например, технология 3D-взбивания шариков использует быстро ускоренное движение шариков для измельчения образцов тканей.1 Шарики внутри лизирующих пробирок перемешиваются посредством осциллирующего разнонаправленного движения. Кроме того, доступен большой ассортимент наборов для лизирования, которые дают возможность гомогенизировать любые биологические образцы. В эти наборы входят пробирки объемом от 0,3 до 15 мл, а также шарики из керамики, стекла или нержавеющей стали, различающиеся по диаметру.

Помимо проблем, связанных с выбранным методом лизиса, свойства образца также могут препятствовать экстракции аналита. Некоторые образцы содержат лишь небольшое количество аналитов, например ДНК из сперматозоидов. Следовательно, исследователям необходимо обрабатывать большие объемы образцов, гомогенизация которых требует больше времени и может превышать максимальный объем прибора. Кроме того, некоторые образцы, такие как семена, кожа, кости или опухолевая ткань, трудно гомогенизировать из-за их твердости, эластичности, минерализации или волокнистой природы. при лизисе выделяется больше тепла, что приводит к деградации или денатурации некоторых термочувствительных аналитов.

Precellys® Evolution Touch — универсальный гомогенизатор от Bertin Technologies. Он использует технологию бисерного измельчения, которая является золотым стандартом гомогенизации тканей, для измельчения даже самых сложных образцов, таких как зубы и волосы, за несколько минут. Он способен обрабатывать образцы различных размеров, веса и объема. Более того, он может гомогенизировать до двадцати четырех образцов одновременно. Поскольку симметрия прибора позволяет всем пробиркам следовать одному и тому же движению, это обеспечивает одинаковую эффективность гомогенизации для каждого образца. Precellys® Evolution Touch оснащен сенсорным экраном, который реагирует даже тогда, когда пользователь носит перчатки. Кроме того, исследователи могут выбирать между тридцатью различными наборами для лизирования, предназначенными для гомогенизации образцов различных свойств и объемов. Благодаря скорости до 10 000 об/мин в образцах выделяется минимальное количество тепла, что обеспечивает безопасность термочувствительных аналитов. Кроме того, прибор совместим с охлаждающим устройством Cryolys Evolution, которое позволяет поддерживать температуру образца от 0 до 10 °C до и во время гомогенизации.

Благодаря разнообразию используемых размеров пробирок, многочисленным вариантам наборов для лизиса и возможности одновременной обработки нескольких образцов Precellys® Evolution Touch является универсальным и эффективным гомогенизатором, подходящим для многих областей исследований.

Рекомендации